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高通量点突变

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详细介绍Detailed Introduction

高通量点突变(体外)

  实验原理
       点突变是基因功能恢复和研究氨基酸在蛋白中功能的重要手段,本公司点突变是利用专利技术MultiMutTM技术,与常规的突变每次只能突变一个位点不同,可以方便的一次性对DNA上多个指定位点进行突变或回复突变。也可以对多个位点同时进行随机突变,以便研究多个关键位点随机组合后的蛋白功能变化,可以快速的建立多个位点随机突变的蛋白突变体库。为体外蛋白进化研究提供了高效解决方案。

       实验用途
       1. 消除DNA序列上的特别位点,如酶切位点、终止位点等;
       2. 密码子同意突变,观察密码子改变对翻译效率的影响;
       3. 突变氨基酸序列分析氨基酸改变对蛋白性能的影响。
  实验流程和周期
  客户在线下单 — 订单/实验材料确认 — CloneCAD实验设计 — 突变实验  【实验周期:提交订单时根据具体实验难度系统自动计算】
  优势特点
  1. 多个位点一次性突变;
  2. 多个位点同时随机突变
  3. 实验周期:10个工作日左右
  4. 可随时查看项目实时进展情况 。
  客户下单
  下单流程:注册成为用户,登录客户端进行下单。
  项目信息填写:
  1. 客户按照页面提示填写项目名称,选择项目类型[高通量点突变],填写个人信息及联系方式进行预提交;
  2. 提交项目所需要的具体信息,包括:目标基因突变之前的基因序列,突变后的基因序列,基因名称等注释信息,如果特别要求请在备注中注明。填写完毕后价格由系统自动计算生成。如果客户需要进行后续转基因实验载体构建完毕后可以一键生成转基因项目。
  实验信息
  实验过程中客户可以随时登录管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告查看地址。实验结题后,实验报告,检测结果可在线查看或打印,并永久保留。实验过程用到的菌株、载体、受体材料免费为客户保存半年后销毁。
  实验结果
  1. 构建好的载体图谱、全序列和注释信息;
  2. 构建部位的测序结果;
  3. 构建好的载体及其保存菌株。
  实验案例
  对GUS基因同时进行6点突变,一次性全部成功。

       

  MultiMut突变效果检测,对1.6kb gus基因上进行6个点进行不同类型的突变(上),突变后的片段克隆到突变载体进行转化大肠杆菌,然后进行菌液PCR鉴定,约75%的为目标克隆(中),随机去6个克隆进行测序,结果显示每个克隆的6个点全部实现了正确突变,突变成功率100%。


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